有机文化网格6井阿明·凯利·帕斯卡

有关该协议及其在人类干细胞衍生有机物培养中的应用的详细信息，请参阅我们预印本中的方法部分：



如果您使用此网格或此网格的任何修改版本用于研究出版物，请引用上述预印本(或同行评议的手稿，当它可用时)。

网格的概念来自Neal Amin，最初的网格是由Tommy Li设计的，Neal Amin提供了输入，这里提供的最终网格设计是由Neal Amin设计的。

这个3D网格插入到一个标准格式的6孔培养板中。它可以用聚乳酸印刷，聚乳酸会慢慢降解成乳酸，对细胞培养是安全的。在插入平板的过程中，围绕外部的机翼受到压缩，将其紧紧地固定在一起。在一些线上放置间隙以允许对网格进行轻微压缩-这一点很重要，因为3D打印每次都会略有不准确，并且即使存在打印缺陷，压缩间隙也允许网格适合。高度为6毫米，但可以很容易地调整。底部有一些小的扩散口，允许液体混合，但培养的有机物不能在它们之间移动。

随着时间的推移(1-2d)，格子可能会轻微地挤压6孔培养板的塑料，它可能会变得不那么牢固，甚至会移位。因此，在将硅胶插入6孔培养板之前，可以沿着网格的外缘涂抹硅胶。硅胶是惰性的，可以在几小时到一天内固化。硅胶附着的格栅将与6井板保持至少几个月的连接。

将格栅固定在6孔板内后，可以用70%的乙醇消毒格栅，并涂上疏水溶液聚HEMA，以防止有机物附着在PLA格栅上。在此灭菌和涂布步骤之后，网格可以在标准的组织培养孵化器中进一步紫外线灭菌。

最后，用PBS清洗网格，加入培养液(约6ml)，并在网格的每一孔中放置单独的有机体进行长期培养。媒体吸入可以从吸入区进行。也可以在此区域添加介质。